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BUNSEN本生闡述：關于小鼠ELISA試劑盒的操作方法
BUNSEN本生的小鼠ELISA試劑盒操作方法主要分為?雙抗體夾心法?和?間接法?兩類，兩類方法的操作步驟均經過標準化驗證，適配小鼠樣本的檢測需求，具體操作流程如下：
一、雙抗體夾心法操作步驟
該方法適用于檢測小鼠樣本中的大分子抗原，是小鼠ELISA試劑盒常用的操作模式。
包被?：用0.05M pH9.6碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量1——10μg/ml，每個聚苯乙烯板反應孔加0.1ml，4℃過夜，次日棄去孔內溶液，洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。
加樣?：加入0.1ml稀釋后的待檢樣品，37℃孵育1小時后洗滌，同步設置空白孔、陰性對照孔及陽性對照孔。
加酶標抗體?：各反應孔加入0.1ml新鮮稀釋的酶標抗體，37℃孵育0.5——1小時后洗滌。
顯色?：各反應孔加入0.1ml臨時配制的TMB底物溶液，37℃避光反應10——30分鐘。
終止反應?：各反應孔加入2M硫酸0.05ml終止顯色。
結果判定?：可肉眼觀察顏色深淺用“+"“~"標記陰陽結果，也可在ELISA檢測儀450nm波長下測OD值，OD值大于陰性對照2.1倍即為陽性。
二、間接法操作步驟
該方法適用于檢測小鼠樣本中的特異性抗體，操作流程與夾心法有部分差異。
包被?：用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1——10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過夜后洗滌3次。
加樣?：加入0.1ml稀釋后的待檢未知抗體樣品，37℃孵育1小時后洗滌，同步設置空白、陰性及陽性對照孔。
加酶標二抗?：各反應孔加入0.1ml新鮮稀釋的酶標第二抗體（抗抗體），37℃孵育35-60分鐘后洗滌，最后一遍用雙蒸水洗滌。
后續顯色、終止、結果判定步驟?：與雙抗體夾心法的第4、5、6步一致。
注：以上資料僅供參考，不作為實際數據，實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。
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