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人白細胞介素21(IL-21)ELISA試劑盒實驗使用說明書
BS-1648人白細胞介素21(IL-21)ELISA試劑盒
以下是關于人白細胞介素21(IL-21)ELISA試劑盒的實驗使用說明：
一、實驗原理
采用雙抗體夾心法檢測樣本中IL-21濃度?。預包被的捕獲抗體與樣本中IL-21結合后，再與HRP標記的檢測抗體形成復合物，通過TMB顯色反應(藍色→黃色)測定450nm吸光度，顏色深淺與IL-21濃度正相關?。
二、試劑盒組成
預包被板?：96孔或48孔(2-8℃保存)?
標準品?：濃度通常為0-320pg/mL或360ng/L(需稀釋)?
檢測抗體?：生物素化抗體工作液?
顯色系統(tǒng)?：TMB底物A/B液、終止液?
洗滌液?：20-30倍濃縮液(使用前需稀釋)?
三、樣本處理
血清/血漿?：
血清：室溫凝固10-20分鐘后，2000-3000×g離心20分鐘?
血漿：EDTA/肝素抗凝，3000×g離心15-30分鐘?
避免反復凍融，-20℃分裝保存?
細胞上清/組織勻漿?：
細胞上清：3000×g離心10分鐘?
組織勻漿：PBS勻漿后5000×g離心5-10分鐘?
四、操作步驟
標準品稀釋?：按說明書梯度稀釋(如0-320pg/mL)?
加樣孵育?：
每孔加100μL樣本或標準品，37℃孵育90分鐘?
洗滌?：手工洗板5次(每孔加滿洗滌液，靜置1分鐘后甩干)?
抗體孵育?：
加入生物素化抗體工作液100μL，37℃孵育60分鐘?
酶結合物?：
加入HRP標記抗體100μL，37℃孵育30分鐘?
顯色?：
加TMB底物100μL，避光顯色15分鐘?
終止與檢測?：
加終止液100μL，3分鐘內測定OD450值?
五、注意事項
試劑保存?：
未開封試劑盒2-8℃保存，開封后板條需密封防潮?
顯色劑B需避光，終止液含強酸需謹慎操作?
質量控制?：
每次實驗需包含空白孔(僅加稀釋液)?
板內/板間變異系數(shù)應
注：以上資料僅供參考，具體請咨詢技術老師或品牌供應商。
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